Quantification du cytomégalovirus par la technique de PCR en temps réel
Par : Gerbaud, Estelle
Document archivé le : 25/08/2010
Ce travail a consisté à développer une technique de PCR en temps réel pour la quantification du CMV dans la fraction leucocytaire du sang. Une co-amplification du génome viral et du gène de l'albumine a été effectuée, dans un même tube, pour obtenir un résultat précis sur lequel les rendements des étapes de préparation de l'ADN et d'amplification n'interfèrent pas. Tout d'abord, nous avons optimisé les paramètres opératoires pour obtenir les meilleures conditions de réalisation de la technique et testé sa spécificité. Puis par clonage plasmidique, nous avons réalisé une gamme standard avec laquelle ont été évalués la sensibilité, la linéarité et la reproductibilité de la méthode. L'application de la PCR à de véritables prélèvements biologiques a permis d'apporter des modifications pour augmenter la sensibilité de cette méthode.
2003NANT071P
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