Microparticules endothéliales et plaquettaires en cytométrie en flux dans les thrombocytoses
Par : Chiron, Louise-Marie
Document archivé le : 11/07/2014
Les microparticules (MP) circulantes sont de petites vésicules membranaires de 0,1 à 1 µm de diamètre, relarguées par les cellules en réponse à l'activation ou l'apoptose. Bien que leur détection dans le plasma ne soit pas standardisée, la cytométrie en flux (CMF) est la technique la plus communément utilisée pour les mettre en évidence. Les objectifs de cette étude étaient de mettre au point la technique de dosage par CMF des MP d'origine plaquettaire (PMP) et endothéliale (EMP) en CMF au CHU de Nantes, et d'étudier l'intérêt de cette méthode dans le diagnostic différentiel entre thrombocytose réactionnelle (TR) et thrombocytémie essentielle (TE). MATERIEL ET METHODES: La technique a été mise au point, sur la base de données de la littérature, sur le cytomètre Navios (Beckman Coulter) en utilisant l'option W2 permettant l'accès à la CMF dite de haute sensibilité. Au total, 13 sujets sains, 22 patients présentant une TE (au diagnostic ou non traitée) et 13 patients souffrant de TR ont été inclus. Les acquisitions ont été réalisées sur des plasmas pauvres en plaquettes (PPP) obtenus à partir d'un protocole pré-analytique stringent. RESULTATS: L'évaluation de la méthode s'est avérée satisfaisante. La recherche d'EMP était négative dans l'ensemble des échantillons.
Significativement moins de PMP ont été retrouvées chez les sujets sains par rapport aux séries TR et TE. Le nombre de PMP était plus élevé pour les TE que pour les TR, mais de façon non significative. Une corrélation négative entre le nombre de PMP et le nombre de plaquettes a été observée dans le groupe des sujets contrôles et dans la série TR. Au contraire, dans le groupe TE, cette corrélation était positive. Par ailleurs, dans la population TE, il n'existe pas de différence significative entre les patients présentant ou non une mutation de Jak2. CONCLUSION : La technique mise au point peut être appliquée à Nantes à d'autres situations physiopathologiques. L'absence d'EMP suggère qu'il existe peu d'altérations vasculaires dans les pathologiques étudiées. La recherche des PMP a permis d'obtenir des valeurs comparables à celles publiées chez les sujets sains et confirme que les altérations de la thrombopoïèse sont associées à leur augmentation. Les résultats obtenus laissent également supposer qu'il existe un mode de production de PMP différent chez les sujets pathologiques par rapport aux sujets sains. Le nombre de PMP ne semble cependant pas à lui seul contribuer au diagnostic de TE.
14NANT004P
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